Auswertung und Analyse von Proteinen mit Western Blot

Ziel:

Wichtige Grundlagen werden erörtert, bevor die Laborarbeiten pipettiert und durchgeführt sowie ausgewertet werden.

Inhalt:

• Übersicht Blot-Typen Historie
  
• Darstellung der Probenvorbereitung
  
• Besprechung und Wahl von Lyse-Puffern
  
• Darstellung von Inhibitoren für Lyse-Puffer wie. z.B. Protease-Inhibitoren
  
• Einführung in verschiedene Proteinbestimmungen
  
• Diskussion von Probenpräparationsmöglichkeiten für Native und Nicht-Reduzierende Protein-Proben
  
• Besprechung von Elektrophoreseparametern wie z.B. das Bestimmen der Porengröße sowie das Anwenden von verschiedenen Gelen wie z. B. Tricin-SDS-Gele
  
• Darstellung von verschiedenen Transfermethoden und Systemen für Proteine
  
• Übersicht der Visualisierung von Proteinen in Gelen sowie auf Membranen
  
• Immunfärbungsmöglichkeiten bei Western Blots
  
• Durchführung einer SDS-PAGE Gelelktrophorese mit verschiedenen Proben sowie eines Semi-Dry-Transferlaufs
  
• Durchführung einer Immunofärbung mit Chemilumineszenz Detektion
  
• Excel als Werkzeug für Geräteunabhängige Auswertung von Western-Blot Daten
  
• Gemeinsame Auswertung der produzierten Labor-Daten
  
• Digitalisierung von Proteinbanden sowie Quantifizierung mit ImageJ und Excel als Werkzeug unter anderem durch das Anwenden von Formeln, wie z. B. Summe, Mittelwert, Standardabweichung, u.s.w.
  
• Besprechung von Troubleshooting-Fällen

Zielgruppe:

Der Western Blot Kurs richtet sich an erfahrene Anwender und an Einsteiger. Die Zielgruppe umfasst Angestellte im technischen und wissenschaftlichen Bereich sowie Laboranten mit abgeschlossener Berufsausbildung und Mitarbeitern aus biologisch-biowissenschaftlichen und medizinischen Einrichtungen mit Labor-Erfahrung.

» Programmdetails und Anmeldung

• Einführung in die Zellkultur (02. - 03.05.2024 Seminar (Berlin))
• Realtime PCR und digital PCR Kurs (06. - 07.05.2024 Seminar (Berlin))
• The Biotech & Pharma Summer School - From Target to Market (10. - 13.09.2024 Lehrgang (Berlin))
• GMP Biotech Summer School - Good Manufacturing Practice Basic Course Biotechnology & ATMPs (08. - 17.10.2024 Lehrgang (Berlin))
• Fachkraft für Molekularbiologie (TÜV) (11. - 21.11.2024 Lehrgang (Berlin))